首頁上指標的測量方法。浮游植物檢測葉綠素的測量方法

所有綠色植物都含有用于光合作用的色素。因此，測定水樣中色素的含量也是浮游植物檢測的一種定量方法。

雖然每門藻類的色素組成不同，但都含有葉綠素a，葉綠素a不僅含量高，而且是整個光合作用過程中最重要的能量傳遞中心。因此，葉綠素a值主要作為衡量浮游植物檢測蓄積量的指標。

與計數法相比，葉綠素測定方法簡單、速度快，已成為測定浮游植物檢測常備存儲量的常用方法。同時，葉綠素值也可以通過某些轉換來指示初級生產的大小。

1、水樣采集

為測量葉綠素而收集水樣的方法與測量浮游植物檢測數量的方法相同。收集的水樣可以根據水中浮游植物檢測的數量來確定，通常在0.5到2升之間。如果浮游植物檢測含量特別低，則需要增加水樣的數量。

2、水樣保存

將水樣注入瓶中后，應避免陽光直射，置于蔭涼處。如果進一步處理水樣需要較長時間(如隔天)，應低溫(- 4℃)保存，并加入1%碳酸鎂懸浮液，每升水樣加入1ml，防止酸化。

3、吸濾

安裝過濾設備——包括砂芯過濾裝置(直徑50mm)、過濾瓶、負壓表、真空泵等。將過濾膜放入過濾器中。濾膜采用玻璃纖維濾膜或混合纖維酯類微孔濾膜(孔徑為0.8微米)。前者過濾速度快，當需要過濾大量水樣時應優先使用。如果水樣中沒有添加碳酸鎂溶液，則應在濾膜上過濾約0.5-1毫升碳酸鎂溶液，以防止酸化。過濾時的負壓不應超過0.5個大氣壓(50千帕)。

過濾完成后，用鑷子小心地將濾膜取下，對折(浮游植物檢測樣品側面朝內)，然后用普通濾紙盡可能多地吸收和去除濾膜上的水分。如果不能立即提取，過濾膜應在黑暗和低溫條件下保存。可在普通冰箱冷凍室保存數天;在-20℃低溫冰箱中可保存30天。

4、提取

樣品先研磨，以提高色素提取效果。研磨可以使用玻璃砂漿或玻璃均質器。將濾膜切成小片，放入砂漿或均質器中，加入7-8毫升萃取劑，研磨幾分鐘。將研磨好的勻漿轉移到帶塞子和刻度的離心管中。用少量萃取劑沖洗砂漿或均質器，并將沖洗液合并到離心管中，直到最終體積略小于10毫升。將管道塞蓋好，搖一搖，再置于黑暗、低溫區域。

提取溶液可以是90%丙酮、90%或100%甲醇、90%乙醇等。最常用的是丙酮。近年來，國際相關專家進行了研究和實驗，從提取效率、安全、健康等方面考慮，建議今后不應使用丙酮，而應使用乙醇作為萃取劑。多年來，丙酮在中國使用較多，考慮到數據的可比性，仍然可以繼續使用。

提取時間應不少于6小時(乙醇或甲醇)或20小時(丙酮)，且不超過24小時。

5、離心機

將含有提取液的離心管放入離心機中，以3500-4000轉/分的速度離心10-15分鐘。將上層葉綠素萃取清液轉入定量試管中，再用少量丙醇懸浮沉淀，離心得到萃取清液。重復1-2次。最后，將提取物稀釋至10毫升。

6、光密度測量

讀取波長為665納米和750納米的光密度，以比色米為單位，具有一定的光程(1-3厘米)。在750納米處的光密度被用來校正吸收值。